虽然嵌合抗原受体(CAR)-T疗法已在复发难治血液系统恶性肿瘤的治疗中显示出优越的疗效，但随着临床应用的推广，其局限性逐渐凸显。首先，已上市CAR-T细胞大多为自体来源，其制备周期久，患者容易错过最佳治疗时机；其次，CAR-T细胞疗法不良反应发生率高且程度重，可危及生命；最后，传统的单靶点CAR-T细胞肿瘤覆盖范围有限，仅有部分肿瘤患者可以获益。因此，临床上亟待开发安全可控、肿瘤覆盖面广、通用型新一代细胞免疫治疗产品。

2025年1月9日，浙江大学与杭州启函生物科技有限公司合作，在 Cell Reports Medicine 在线发表题为 “CD70-Targeted iPSC-Derived CAR-NK Cells Display Potent Function Against Tumors and Alloreactive T cells” 的研究论文。浙江大学黄河教授、胡永仙教授、王东睿研究员，启函生物杨璐菡博士为共同通讯作者，浙江大学博士研究生王林钦、王艺芸、启函生物何向军、浙江大学良渚实验室博士后莫灼锚为共同第一作者。

NK细胞是固有免疫细胞，可识别并清除异常细胞，且缺乏TCR表达而在同种异体之间输注无诱导移植物抗宿主病风险，是天然的通用型细胞治疗产品。然而原代细胞多基因编辑及体外扩增效率依然较为受限。因此，本团队搭建稳健的iPSC来源NK细胞的制备体系，实现批量化生产。此外，iPSC来源NK细胞易于进行多基因编辑，可实现细胞产品的更新迭代，极具临床应用前景。

清除肿瘤能力弱、体内存续时间短是NK细胞疗法目前的瓶颈。基于iPSC易于进行多基因编辑的优势，本团队在iPSC中引入多种功能元件。在抗肿瘤能力上，本团队在iPSC中引入靶向CD70 CAR分子以靶向泛肿瘤，引入hnCD16以增强NK细胞固有的ADCC作用；在NK细胞存续及增殖能力上，本团队在iPSC中引入CD70 KO以避免70CAR介导的自杀伤，同时引入IL15RF以增强NK细胞的扩增能力。

进而，研究团队将多基因编辑的iPSC成功定向分化至70CAR-iNK细胞，其可以通过NK细胞固有抗肿瘤作用及CD70-CAR元件有效清除多种实体瘤及血液肿瘤细胞；而在异种移植的小鼠肿瘤模型中，研究团队进一步证实了70CAR-iNK细胞可在体内有效抑制淋巴瘤以及肾癌在小鼠体内的进展。此外，该研究发现体外诱导的同种异体反应性T（alloT）细胞CD70表达水平逐渐升高，且CD70表达与T细胞的同种异体反应活性密切相关。70CAR-iNK细胞可清除CD70阳性alloT细胞，进而降低其通过同种异体反应在体内排斥NK细胞的活性，从而提高iNK细胞的体内存续能力。

该研究构建了iPSC来源的多基因编辑CD70 CAR-NK细胞，并揭示了其具有高效的抗肿瘤功能及杀伤alloT细胞促进体内存续的能力，为临床转化提供重要依据。

论文原文链接： https://www.cell.com/cell-reports-medicine/fulltext/S2666-3791(24)00660-8